小朗課堂 | 實(shí)驗(yàn)室核酸污染問題解決方案 2023-01-05
對于每天要跑PCR實(shí)驗(yàn)的小伙伴來說,一根漂亮的擴(kuò)增曲線絕對是他們的心情曲線,如果突然這根擴(kuò)增曲線翹尾了,心情大概就是小朗最近就收到這樣一名用戶的反饋,她說在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時,擴(kuò)增曲線翹尾了......她的擴(kuò)增曲線如下圖所示:如果你也被這樣的問題困擾,那么下面的內(nèi)容絕對值得你收藏!擴(kuò)增曲線翹尾是指在實(shí)驗(yàn)結(jié)果中有曲線出現(xiàn)末尾起跳但是沒有完整擴(kuò)增的現(xiàn)象,導(dǎo)致這個現(xiàn)象出現(xiàn)的原因深究下來主要是2點(diǎn):1、目的基因濃度過低,CT值過高,導(dǎo)致曲線后移,這樣就會出現(xiàn)翹尾現(xiàn)象;2、在反應(yīng)體系中沒有加入模板DNA的情況下,外源污染的核酸進(jìn)入反應(yīng)體系也會出現(xiàn)翹尾。如果是第一個原因,那么給目的基因增加濃度即可。如果是第
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